雙水相的疏水因子HF值越大,則溶質的分配系數越( ),為何?
作者:化工綜合網發布時間:2022-02-03分類:無機化工瀏覽:149
分配系數
INM=INMe(靜電作用)+INMh(疏水作用)+INMl(生物親和作用)
靜電作用
實際的雙水相系統中通常含有緩沖液和無機鹽等電解質,當這些離子在兩相中分配濃度不同時,將在兩相間產生電位差。此時,荷電溶質的分配平衡將受相間電位的影響。
疏水作用
(1)在pH為等電點的雙水相中,蛋白質主要根據表面疏水性的差異產生各自的分配平衡。同時,疏水性一定的蛋白質的分配系數受雙水相系統疏水性的影響。
(2)雙水相系統的相間疏水性差用疏水性因子HF表示。
影響分配因素
(1) 聚合物及其濃度組成的影響
a 相對分子質量
b 降低聚合物的分子質量,則蛋白質易分配于富含該聚合物的相中。
c 聚合物濃度影響 成相系統的總濃度越高,系線越長,蛋白質越容易分配于其中的某一相
(2)鹽與緩沖液
a 鹽離子的不均勻分配改變兩相間電位差
b影響蛋白質的表面疏水增量,不同鹽的鹽析效果不同
c 擾亂雙水相系統,改變相組成。
(3) pH
a改變表面電荷數,改變分配系數。 因此,pH與蛋白質的分配系數之間存在一定關系。
等電點測定: 加入不同種類的鹽時,由于相間電位不同,它們之間的關系曲線也不同,但在等電點處,由于Z=0,分配系數應相同,即關系曲線交于一點。
通過測定不同鹽類存在下分配系數與pH值之間的關系曲線的交點,可測定蛋白質等的等電點,這種方法稱為交錯分配法。
b pH 影響磷酸鹽的解離。因此影響PEG/KPi系統的相間電位和蛋白質的分配系數。
c蛋白質自身結構和性質隨pH的變化而改變
(4) 溫度的影響(離開臨界點遠,不太敏感) 一般常溫
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