簡述如何篩選一個產淀粉酶效率比較高的菌株。
作者:化工綜合網發布時間:2023-04-02分類:聚合物瀏覽:128
紫外線誘變選育α-淀粉酶高產菌株一、實驗目的 1. 學習菌種的物理因素誘變育種基本技術。 2. 通過誘變技術篩選出高產ɑ-淀粉酶的菌株。 二、實驗原理 紫外線是一種最常用有效的物理誘變因素,其誘變效應主要是由于它引起DNA結構的改變而形成突變型。紫外線誘變一般采用15W或30W紫外線燈,照射距離為20~30 cm,照射時間依菌種而異,一般為1~3 min,死亡率控制在50%~80%為宜。被照射處理的細胞,必須呈均勻分散的單細胞懸浮液狀態,以利于均勻接觸誘變劑,并可減少不純種的出現。同時,對于細菌細胞的生理狀態,要求培養至對數生長期為最好。 本實驗以紫外線處理產淀粉酶的枯草桿菌,通過透明圈法初篩,選擇淀粉酶活力高的生產菌株。 三、實驗材料 ⑴ 菌種 產淀粉酶枯草芽孢桿菌 ⑵ 器材 裝有15W或30W紫外燈的超凈工作臺、電磁力攪拌器(含轉子)、低速離心機、培養皿、涂布器、10mL離心管、(1、5、10mL)吸管、250mL三角瓶、恒溫搖床、培養箱、直尺、棉簽、橡皮手套、洗耳球 ⑶ 培養基和試劑 ① 無菌水、75%酒精 ② 0.5%碘液 碘片1g、碘化鉀2g、蒸餾水200mL。先將碘化鉀溶解在少量水中,再將碘片溶解在碘化鉀溶液中,待碘片全部溶解后,加足水即可。 ③ 選擇培養基 可溶性淀粉2g,牛肉膏1g,NaCl 0.5g,瓊脂2g,蒸餾水100mL,pH6.8~7.0,121℃滅菌20min。 ④ 肉湯培養基 牛肉膏0.5g,蛋白胨1g,NaCl 0.5g,蒸餾水100mL,pH7.2~7.4,121℃滅菌20min。 四、實驗步驟 ⑴ 菌體培養 取枯草芽孢桿菌一環接種于盛有20 mL肉湯培養基的250mL三角瓶中,于37℃振蕩培養12h,即為對數生長期的菌種。 ⑵ 菌懸液的制備 取5mL發酵液于10mL離心管中,以3000r/min離心10min,棄去上清液。加入無菌水9mL,振蕩洗滌,離心10min,棄去上清液。加入無菌水9mL,振蕩均勻。 ⑶ 誘變處理 將菌懸液傾于無菌培養皿中(內放一個磁力攪拌棒),置電磁力攪拌器上于超凈工作臺紫外燈下(距離30cm)照射0.5~1min。 ⑷ 取0.1~0.2mL誘變后菌懸液于選擇培養基平板上,用涂布器涂勻。置37 ℃暗箱培養48h。 ⑸ 在長出菌落的周圍滴加碘液,觀察并測定透明圈直徑(C)和菌落直徑(H),挑選C/H值最大者接入斜面保藏。 五、注意事項 1. 紫外線對人體的細胞,尤其是人的眼睛和皮膚有傷害,長時間與紫外線接觸會造成灼傷。故操作時要戴防護眼鏡,操作盡量控制在防護罩內。 2. 空氣在紫外燈照射下,會產生臭氧,臭氧也有殺菌作用。臭氧過高,會引起人不舒服,同時也會影響菌體的成活率。臭氧在空氣中的含量不能超過0.1%~1%。
怎樣提取淀粉酶.ppt
淀粉 -用途
1.為人體提供的能量
2.制氫氣
淀粉在人體內先被唾液淀粉酶分解成麥芽糖,然后麥芽糖分解成葡萄糖。葡萄糖經過糖酵解過程生成丙酮酸,丙酮酸;或者淀粉直接分解成糖酵解中間產物葡萄糖-1-P(這一部分沒來得及和唾液充分混合)。然后生產丙酮酸。丙酮酸又和酶結合生成乙酰輔酶A。然后進入檸檬酸循環圈。先生成檸檬酸。檸檬酸循環圈里面每消耗一個葡萄糖,生成6個NADH,2個FADH2 (電子載體)。然后在線粒體膜結構內這些電子通過ATPase生成大量的ATP,能量。
淀粉在制作其他食品中的作用
淀粉除了用于烹調之外,在各類食品加工中也起到了很大的作用,利用淀粉作為配料或主料的食品有:各種粉腸、灌肚、涼粉、炯子、粉皮、粉絲、火腿、羅漢肚等。
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