加完trizol以后要馬上提嗎

具體要看你的實驗要求，一般是不需要的。

加800ul Trizol，樣品裂解后加氯仿，分層，沉淀RNA前，加5-10ug RNase-free糖原，糖原會與RNA一同沉淀出來，糖原濃度不高于4mg/ml時不會影響反轉錄cDNA第一鏈的合成，也不影響PCR反應。

RNA在Trizol試劑中不會被RNase降解。但提取后繼續處理過程中應使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150 ℃烘烤4h，塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min，然后用水徹底清洗，再滅菌，即可去除RNase。

用的天根的trizol，-80度冰箱的話至少存兩三個月沒問題，4度冰箱也能存幾天。室溫的話，放一個小時沒什么問題，而且時間太短反而裂解不充分。

TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑，可以直接從細胞或組織中提取總RNA。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性，因此對純化RNA及標準化RNA的生產十分有用。

牛不吃,爛鼻子,流口水是什么病?

口蹄疫 Aftosa （屬一類傳染病）俗名“口瘡”、“辟癀”，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。主要侵害偶蹄獸，偶見于人和其他動物。其臨診特征為口腔粘膜、蹄部和乳房皮膚發生水皰。 [編輯本段]病原 口蹄疫病毒屬于微核糖核酸病毒科口蹄疫病毒屬，是目前所知病毒中最細微的一級。其最大顆粒直徑為23納米，最小顆粒直徑為7―8納米。目前已知口蹄疫病毒在全世界有七個主型c A、O、C、南非1、南非2、南非3和亞洲1型，以及65個以上亞型。O型口蹄疫為全世界流行最廣的一個血清型，我國流行的口蹄疫主要為O、A、C三型及ZB型(云南保山型)。據觀察，一個地區的牛群經過有效的口蹄疫疫苗注射之后，1―2月內又會流行，這往往懷疑是另一型或亞型病毒所致。這是因為該病毒易發生變異。該病毒對外界環境的抵抗力很強，在冰凍情況下，血液及糞便中的病毒可存活120―170天。陽光直射下60分鐘即可殺死；加溫85℃15分鐘、煮沸3分鐘即可死亡。對酸堿之作用敏感，故1％一2%氫氧化鈉、30％熱草木灰、1％一2％甲醛等都是良好的消毒液。 [編輯本段]進行特點 牛尤其是犢牛對口蹄疫病毒最易感，駱駝、綿羊、山羊次之，豬也可感染發病。本病具有流行快、傳播廣、發病急、危害大等流行病學特點，疫區發病率可達50％一100％，犢牛死亡率較高，其他則較低。病畜和潛伏期動物是最危險的傳染源。病畜的水皰液、乳汁、尿液、口涎、淚液和糞便中均含有病毒。該病人侵途徑主要是消化道，也可經呼吸道傳染。本病傳播雖無明顯的季節性，譴呵锪郊窘隙啵繞涫譴杭盡７綰湍窶嘁彩竊毒嗬氪サ囊蛩刂弧 [編輯本段]癥狀 該病潛伏期1―7天，平均2―4天廣捕牛精神沉郁，閉口，流涎，開口時有吸吮聲，體溫可升高到40一41℃。發病1―2天后，病牛齒齦、舌面、唇內面可見到蠶豆到核桃大的水皰，涎液增多井呈白色泡沫狀掛于嘴邊。采食及反芻停止。水皰約經一晝夜破裂，形成潰瘍，這時體溫會逐漸降至正常。在口腔發生水皰的同時或稍后，趾間及蹄冠的柔軟皮膚上也發生水皰，也會很快破潰，然后逐漸愈合。有時在乳頭皮膚上也可見到水皰。本病一般呈良性經過，經一周左右即可自愈；若蹄部有病變則可延至2―3周或更久；死亡率1％--2％，該病型叫良性口蹄疫。有些病牛在水皰愈合過程中，病情突然惡化，全身衰弱、肌肉發抖，心跳加快、節律不齊，食欲廢絕、反芻停止，行走搖擺、站立不穩，往往因心臟麻痹而突然死亡，這種病型叫惡性口蹄疫，死亡率高達25％~50％。犢牛發病時往往看不到特征性水皰，主要表現為出血性胃腸炎和心肌炎，死亡率很高。 [編輯本段]病理變化 除口腔和蹄部病變外，還可見到食道和瘤胃粘膜有水皰和爛斑；胃腸有出血性炎癥；肺呈漿液性浸潤；心包內有大量混濁而粘稠的液體。惡性口蹄疫可在心肌切面上見到灰白色或淡黃色條紋與正常心肌相伴而行，如同虎皮狀斑紋，俗稱“虎斑心”。 [編輯本段]診斷 口蹄疫病變典型易辨認，故結合臨床病學調查不難作出初步診斷。其診斷要點為： ①發病急、流行快、傳播廣、發病率高，但死亡率低，且多呈良性經過； ②大量流涎，呈引縷狀； ③口蹄瘡定位明確(口腔粘膜、蹄部和乳頭皮膚)，病變特異(水泡、糜爛)； ④惡性口蹄疫時可見虎斑心； ⑤為進一步確診可采用動物接種試駿、血清學診斷及鑒別診斷等。 口蹄疫與牛瘟區別：牛瘟傳染猛烈，死亡率高；瘤柘膜可見糜爛但蹄部無病變；胃腸炎嚴重；真胃及小腸粘膜有潰瘍。 口蹄疫與牛惡性卡他熱區別：后者常散發；口腔及鼻粘膜有糜爛，但不形成水皰；常見角膜混濁。(A)肪治 口蹄疫宜采取綜合性防治措施。平時要積極預防、加強撿疫，常發地區要定期注射口蹄疫疫苗。常用的疫苗有口蹄疫弱毒疫苗、口蹄疫亞單位苗和基因工程苗，牛在注射疫苗后14天產生免疫力，免疫力可維持4--6個月。一旦發病，則應及時報告疫情，同時在疫區嚴格實施封鎖、隔離、消毒、緊急接種及治療等綜合措施；在緊急情況下，尚可應用口蹄疫高免血清或康復動物血清進行被動免疫，按每千克體重0.5--1毫升皮下注射，免疫期約2周。疫區封鎖必須在最后1頭病畜痊愈、死亡或急宰后14天，經全面大消毒才能解除。 患良性口蹄疫之牛，一般經一周左右多能自愈。為縮短病程、防止繼發感染，可對癥治療：①口腔病變可用清水、食鹽水或O．1％高錳酸鉀液清洗，后涂以1％一2％明礬溶液或碘甘油，也可涂撒中藥冰珊散(冰片15克，硼砂150克，芒硝150克，共研為細末)于口腔病變處；②蹄部病變可先用3％來蘇幾清洗，后涂擦龍膽紫溶液、碘甘油、青霉素軟膏等，用繃帶包扎；③乳房病變可用肥皂水或2％一3~3硼酸水清洗，后涂以青霉素軟膏。患惡性口蹄疫之牛，除采用上述局部措施外，可用強心劑(如安鈉咖)和滋補劑(如葡萄糖鹽水)等。 [編輯本段]蹄疫病原檢測方法 蹄疫反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），用于檢測疑似感染動物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒，適用于口蹄疫病毒的檢測、診斷和流行病學調查。 原理：利用異硫氰酸胍方法提取RNA，在反轉錄酶的作用下，以RNA為模板，以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。利用西安天隆科技有限公司生產的DTC型基因擴增儀，在TaqDNA聚合酶的作用下，經高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環，使特異性DNA片段的基因拷貝數放大一倍。經過35個循環，最終使基因放大數百萬倍。將擴增產物進行電泳，經溴化乙錠染色后，在紫外燈照射下，肉眼可見DNA片段的擴增帶。該方法可以檢測所有亞型的口蹄疫病毒，檢測結果為陽性，需進一步采用分型診斷試劑盒進行進一步檢測。 [編輯本段]防治 防治(1)預防病畜疑似口蹄疫時，應立即報告獸醫機關，病畜就地封鎖，所用器具及污染地面用2%苛性鈉消毒。確認后，立即進行嚴格封鎖、隔離、消毒及防治等一系列工作。發病畜群撲殺后要無害化處理，工作人員外出要全面消毒，病畜吃剩的草料或飲水，要燒毀或深埋，畜舍及附近，用2%苛性鈉、二氯異氰豚酸鈉(含有效氯≥20%)、k%～2%福爾馬林噴灑消毒，以免散毒。接種。對疫區周圍牛羊，選用與當地流行的口蹄疫毒型相同的疫苗，進行緊急接種，用量、注射方法、及注意事項須嚴格按疫苗說明書執行。(2)治療病初，即口腔出現水泡前，用血清或耐過的病畜血液治療。對病畜要加強飼養管理及護理工作，每天要用鹽水、硼酸溶液等洗滌口腔及蹄部。要喂以軟草、軟料或麩皮粥等。口腔有潰瘍時，用碘甘油合劑(1：豆)每天涂搽3～4天，用大醬或10%食鹽水也可。蹄部病變，可用消毒液洗凈，涂甲紫溶液(紫藥水)或碘甘油，并用繃帶包裹，不可接觸濕地。 應急要點 ●發現牛、羊、豬等偶蹄動物的口腔、蹄部和乳房等處皮膚有水皰和潰爛，出現流涎和跛行，應立即報告所在地區的獸醫部門。 ● 與患病動物接觸后出現眩暈、四肢和背部疼痛、胃腸痙攣、嘔吐、咽喉疼、吞咽困難、腹瀉等癥狀，應立即到醫院就診。 ●奶牛、奶羊患病，其乳汁不能食用。 專家提示 ●北京市對口蹄疫實行強制免疫，獸醫部門定期為偶蹄動物接種疫苗。 ●從外省市引進偶蹄動物時，必須查驗檢疫證明，必須隔離飼養至少兩周，以確認動物是否健康。 ●發現疑似口蹄疫疫情，須及時報告獸醫部門。 ●注意個人防護，盡量避免接觸患病動物。 ●不從疫區引入偶蹄動物及其產品。

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