biospin 質粒DNA小量提取試劑盒
作者:化工綜合網發(fā)布時間:2023-01-31分類:催化劑及助劑瀏覽:140
1.wash buffer中加入無水乙醇后,終濃度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于過多的鹽雜質存在,影響DNA的酶切等反應,wash buffer就是洗去這些鹽雜質的。
2.用無水乙醇沉淀DNA,這是實驗中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般實驗中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合,其乙醇的最終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的價格遠遠比95%乙醇昂貴)。但是加95%的乙醇使總體積增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA損失也增大,尤其用多次乙醇沉淀時,就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時可用95%乙醇代替無水乙酵,最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15-30分鐘即可。如果你沒有加無水乙醇,核酸不能沉淀,都隨洗液棄掉了。
3.十二烷基硫酸鈉(sodium dodecylsulfate)遇到鉀離子后變成了十二烷基硫酸鉀(potassium dodecylsulfate, PDS),鉀離子置換了SDS中的鈉離子形成了不溶性的PDS,而高濃度 的鹽,使得沉淀更完全。大家知道SDS專門喜歡和蛋白質結合,平均兩個氨基酸上結合一個SDS分子,鉀鈉離子置換所產生的大量沉淀自然就將絕大部分蛋白質 沉淀了,讓人高興的是大腸桿菌的基因組DNA也一起被共沉淀了。這個過程不難想象,因為基因組DNA太長了,長長的DNA自然容易被PDS給共沉淀了,盡管SDS并不與DNA分子結合。
需要特別說明的是:醋酸的加入是為了中和NaOH,因為長時間的堿性條件會打斷DNA,所以要中和之。基因組DNA一旦發(fā)生斷裂,只要是50-100 kb大小的片斷,就沒有辦法再被PDS共沉淀了。所以堿處理的時間要短,而且不得激烈振蕩,不然最后得到的質粒上總會有大量的基因組DNA混入。
草莓種植技術
露地高產栽培技術 獲得高產、穩(wěn)產,好效益的栽培技術要點 1、選好品種 豐香有耐熱、耐寒高產、穩(wěn)產、口感好的特性,還比較耐貯藏和運輸。因此,該品種應為百色種植的首選。其它品種,不論是新的、舊的,一定經試種才能大面積種植。 值得注意的是,購苗時一定要把好質量關。這個質量有兩層意思。一層是選取壯苗,即根莖粗壯,無病蟲害,須根多,有4~6片葉,葉柄粗短,葉厚而大;另一層是要通過正規(guī)渠道購苗,訂立購苗協(xié)議,以防假冒偽劣。 2、選地和整地 (1)選地:排、灌方便、光照充足、土質疏松、保水保肥力強的中、晚稻田最適宜。 (2)整地:兩犁兩耙后起畦,再放肥,也可直接起畦,并施基肥后將表土(20cm厚)打細碎。 具體要求: 施基肥—→農家肥750公斤(如腐熟的豬牛雞糞草木灰等),磷肥50公斤促長根,復合肥12.5公斤,一起與表土打碎混勻。 起畦—→每壟寬1米連溝,壟高25~30cm,溝寬25cm,畦面40~50cm,做成梯形。(畫一個簡圖) 3、種植 (1)時間:氣溫在30°C以下,地溫17°左右可定植,廣西大部分地方以10月為最佳時間。也可參考以新年為采果期,倒推50天作為種植期,即10月上旬。有遮陽網的農戶,可在9月底遮陰種植,可提前收果上市,搶好價錢。 (2)種法:單畦雙行,株行距25×25厘米,畝需6000株;20×20規(guī)格,畝用苗7000株。 種時注意:苗莖的弓背向畦溝,深不埋心,淺不露根。種后馬上淋透定根水。5天內畦溝保持水深2/3,而且在7天內每天早、晚各澆水一次。 (3)及時補苗:種后一周,已知苗是否成活,應及時檢查補缺。 4、管理 4—①:種后一個月內:種后一周苗成活,可看苗施速效肥,可促進花芽分化,以薄施勤施為原則。如20%人糞尿,或碳銨與過鈣(1∶2)混合后每公斤兌水50公斤撥澆,5天一次,保持土壤濕潤。出現老葉黃葉及時剝除。該階段保持有五葉一心較好。 草莓生長過程中及時除草,順便松土,有蚜蟲時及時防治。種后一個月,中耕松土一次,順便將起壟時未成梯形的地方修成梯形,并打孔施肥→硫酸鉀25公斤,鉀肥7.5公斤,尿素2.5公斤,過鈣25公斤。孔深15cm,孔位于兩植株之間。施肥后灌水一次,防病蟲害一次。 4—②蓋膜:開花前需蓋膜,在11月中旬,即種后1個月左右。在晴天,露干后進行。方法:兩個人將地膜蓋過畦面后拉直固定,再從兩邊地膜嵌入畦底固定,使面上平直,然后在苗心處撕開地膜,扯出苗,整理成原狀。自蓋膜開始,每周的畦溝灌水一次,并防治病蟲害一次,可噴一次10ppm的赤霉素促抽長。該階段同樣需摘病老葉,保留的葉數為六葉一心。可看苗噴些葉面肥。 4—③結果和采收:保留主花主果,摘除附屬花,一般每株留5~7個有效果即可。該期可噴0.3%磷酸二氫鉀3~4次,提高座果率。如果在開花盛期噴0.2%硫酸二氫鉀或0.3%的硼砂,也有一定增產作用,還可增加果的硬度。選在傍晚葉片潮濕時噴葉背為主。 收完第一批果,馬上施追肥。畝施復合肥15公斤,鉀肥15公斤,視苗情適加少量尿素和磷肥(打孔施),采果前以防治葉螨為主;采果中后期注意防治白粉病、灰霉病。在開花盛期盡量少噴藥。遇有霜凍可加蓋拱棚膜。 5、主要病蟲害 (1)葉斑病:葉片上深紅色小圓斑,擴展到病斑周邊有明顯的紫紅色至灰棕色帶。及時摘病、老、黃葉。發(fā)病前用代森鋅合劑500倍,克菌丹水合劑500倍,70%甲托1000倍。 (2)灰霉病:莖、葉、果均會受害,先出現黃色小斑點,呈油漬狀后擴展至邊緣有褐色病斑,果實會變軟變爛,有灰色霉層。→50%撲海因粉劑800倍、50%速克靈1000倍、百菌清600倍、甲托1000倍等均可用于防治。可在花期噴霧,每周一次,連續(xù)2~3次。 (3)白粉病:葉背出現薄霜狀白色的東西,擴至全株,葉卷湯成匙狀,花瓣變紅色,不開放;幼果感病則不再長大,著色不均。→多氧化霉素1000倍,三唑銅粉劑1500倍,15%硫磺合劑300~400倍。 (4)蚜蟲傳播病菌的主要媒介。敵敵畏、樂斯本、氧化樂果等可按說明書介紹使用。盛花期不宜用氧化樂果,會影響座果。 (5)葉螨類兩種:紅蜘蛛、銹蜘蛛。隱在葉背吸食葉片汁液。受害葉黃化卷曲,植株矮化。各時期會發(fā)生,應從定植成活后開始防治。用藥:20%三氯殺螨楓、三氯殺螨醇600~1000倍,75%克螨特3000倍,殺螨丹600~800倍。 五、采收管理 果由綠色逐漸變白,最后成紅色并具光澤,即為成熟。最初先是見光面著色,隨后側面著色。果熟則軟化,并有香味。 一般開花30天后成熟采收。每批果采收期約3周。鮮食的在果面紅色占70%時可收,著色85%最有風味。加工用的則在果充分熟后收,外運果則在果充分成熟前1~2天收。 因草莓成熟期不一致,最好能每天摘一次。最適采摘時間在露干至高溫之間或傍晚涼快時,否則易爛。采下的果帶有一小段果炳,不傷花萼。采摘后用塑料藍、小竹藍裝,再分級用紙盒,塑盒小包裝,后裝大木箱、紙箱,方便運輸。外運需冷藏車。 內容出自廣西現代農業(yè)科技示范園思** 我個人覺得不錯哦
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